一直认为在复杂的培养基中霉菌是没有办法计数的,今天介绍一个国标的计数方法。
常用方法
如果使用没有固形物的或者固形物含量较低的培养基,霉菌生物量可以用干重和湿重来衡量。这也是非常行之有效的方法。
平板计数
稀释涂布,然后平板计数是我们常用来测细菌、酵母等单细胞微生物生物量的方法,但是如果用这种方法来测定霉菌的生物量该如何测定呢?国标GB4789.15-2010给出了答案:
对于没有办法测定湿重和干重的情况下,平板计数可以作为一种选择,其准确性有待小编验证。
显微计数
同样,利用显微镜计数方法也是我们经常用来对酵母、细菌等单细胞微生物计数。但是利用显微镜怎么对丝状真菌进行计数呢?
HHD-20郝氏计测玻片,又叫霍华德霉菌计数板,包括载玻片、盖玻片和配片(侧位计),用于计算霉菌的数量,主要应用于食品卫生检验领域。
郝氏计测玻片主要包含以下部件:
载玻片
载玻片中央有15~20mm的长方形平面,周围有界沟,两侧有高于平面0.1mm肩堤,平面和肩堤具光学性能。平面中间刻有相聚1.382的两条平行线。
盖玻片
盖玻片表面具有光学性能。使用时将盖玻片置于载玻片的两条肩堤上,当两者平面的光洁度达到一定程度时,彼此接触处可出现一圈圈红、黄、蓝、绿等多彩的彩环,称为牛顿环。使用前,用酒精擦载玻片的肩堤和盖玻片,使其达到一定的光洁度,才易使两者紧密结合而产生牛顿环。
配片(测微计)
配片为中央刻有方格的圆形玻片,使用时放在显微镜的光栏孔上,显微镜一定要有一个标准化的视野。在显微镜放大倍数为90~125倍时,视野直径为1.382mm,则配片小方格的每边长,相当于视野之境)光栏孔直径)的1/6,则该视野为标准视野。
显微镜检测方法比较粗犷,不能精确计数,因此显微计数仅仅提供一种初略评估霉菌生物量的方法。